植物基因组DNA提取 (磁珠法)

发布时间:

2024-03-22 08:47

植物基因组DNA提取

(磁珠法)

 

小麦是我国主要粮食作物之一,所以关于小麦分子生物学方面的研究也非常重要,技术也日益深入,不论是基因克隆与转化,遗传图谱构建,特定基因型检测,分子标记辅助育种及DNA指纹数据库构建等,在小麦育种中应用广泛,高质量的DNA提取的在分子水平上对植物进行系统分析与研究的基础,而植物基因组DNA提取的方法有许多,但是多数需要以植物新鲜组织为样本,这样限制条件较多且步骤多,耗时长。而植物种子可以在常温下保存,这样作为提取基因DNA时可以不受季节和形态等问题限制。下面我们以多种植物种子为实验材料采用

上海领骏生物有限公司的植物基因组DNA提取试剂盒(磁珠法)提取植物基因组DNA

这种试剂盒内包括裂解结合液、磁珠、异丙醇、PK、DTT、洗涤液,还有洗脱液等试剂。

  • 样本处理

  花生 玉米 小麦

  • 裂解结合

在使用时,需要将种子样本放置研钵中破碎,然后加入裂解结合液,使DNA/RNA从细胞中释放出来,然后离心取上清。

  • 洗涤

使用试剂盒中的洗涤液进行洗涤,这一步可提高基因组的纯度。不同样本可进行轻微调整。

  • 洗脱

洗脱的步骤是将吸附在磁珠表面的基因组DNA洗脱下来,并溶于洗脱液中,然后进行其他下游实验。

现将结果报道如下:

案例1:同一批次试剂提取不同植物种子的实验结果:

样本

序号

A260/A280

A260/A230

Conc.(ng/μL)

花生胚芽5 mg

1

1.903

1.063

391.85

2

1.935

1.162

388.85

3

1.950

1.195

395.45

平均值

1.929

1.140

392.05

玉米20 mg

4

2.192

1.897

518.35

5

2.180

1.896

542.1

6

2.188

1.906

538.9

平均值

2.187

1.9

533.117

小麦10 mg

7

2.03

1.32

77.65

8

2.006

1.316

80.85

9

2.003

1.268

81.4

平均值

2.013

1.301

79.967

 

  

1 核酸提取电泳图

上海领骏生物科技有限公司成立于2016年,位于上海市青浦区张江云立方园区。公司长期致力于生物领域内相关产品的研发、生产和销售,产品主要包括磁性纳米材料和磁珠法核酸提取纯化试剂。公司一直坚持以“质量、诚信、团结、奋进”为宗旨,严格规范质量管理体系,持续创新、精益求精,为客户提供优质的产品和服务被认定为上海市专精特新企业。

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